mimmunМедицинская иммунологияMedical Immunology (Russia)1563-06252313-741XSPb RAACI10.15789/1563-0625-2016-3-231-2mimmun-1035Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESПАТОГЕНЕЗ ИЗМЕНЕНИЙ ИММУННОГО СТАТУСА И РОЛЬ АМЛОДИПИНА В ИХ КОРРЕКЦИИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИPATHOGENESIS OF IMMUNE ALTERATIONS AND CORRECTIVE ROLE OF AMLODIPINE IN EXPERIMENTAL CHRONIC RENAL FAILUREОсиковМ. В.OsikovM. V.

д.м.н., профессор, профессор кафедры патофизиологии Южно-Уральского государственного медицинского университета; ведущий научный сотрудник научно-образовательного центра «Проблемы фундаментальной медицины» 454092, Россия, г. Челябинск, ул. Воровского, 64. Тел.: 8 (919) 122-37-99

PhD, MD (Medicine), Professor, Department of Pathophysiology, South Ural State Medical University; Leading Research Associate, Research&Educational Center for the Issues of Fundamental Medicine 454092, Russian Federation, Chelyabinsk, Vorovsky str., 64. Phone: 7 (919) 122-37-99

prof.osikov@yandex.ruГизингерО. А.GizingerO. A.

д.б.н., доцент, профессор кафедры микробиологии вирусологии иммунологии и клинической лабораторной диагностики, старший научный сотрудник НИИ иммунологии

PhD, MD (Biologу), Professor, Department of Microbiology, Virology, Immunology and Clinical Laboratory Diagnostics, Senior Research Associate in Immunology

ЧерепановД. А.CherepanovD. A.

аспирант кафедры патофизиологии

Postgraduate Research Fellow, Department of Pathophysiology

ГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Челябинск, РоссияРоссияSouth Ural State Medical University, Chelyabinsk, Russian FederationRussian Federation2016110720161832312Copyright © Осиков М.В., Гизингер О.А., Черепанов Д.А., 20162016Осиков М.В., Гизингер О.А., Черепанов Д.А.Osikov M.V., Gizinger O.A., Cherepanov D.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.mimmun.ru/mimmun/article/view/1035

Цель работы – исследовать некоторые механизмы изменения иммунного статуса и роль блокатора кальциевых каналов амлодипина в их коррекции при экспериментальной хронической почечной недостаточности (ХПН). ХПН у крыс моделировали путем двухэтапной оперативной резекции 5/6 почечной ткани. Амлодипин применяли per os ежедневно в дозе 0,25 мг/кг в сутки в течение 7 дней. Методом проточной цитофлуориметрии дифференцировали лимфоциты периферической крови: CD3+ (преимущественно Т- лимфоциты), CD45RA+ (преимущественно В-лимфоциты), Annexin 5-FITC+/7-AAD- (с ранними признаками апоптоза, Annexin 5-FITC+/7-AAD+ (с поздними признаками апоптоза и частично некротические клетки. В сыворотке определяли концентрацию мочевины, креатинина, фосфатов, общего кальция, паратиреоидного гормона (ПТГ), IL-1β, IL- 4, интерферона-γ, активность СОД и каталазы. Оценку Th1- и Th2-зависимого иммунного ответа проводили соответственно по реакции гиперчувствительности замедленного типа и по количеству антителообразующих клеток в селезенке крыс, иммунизированных аллогенными эритроцитами. В липидном экстракте лимфоцитов периферической крови исследовали содержание первичных, вторичных и конечных продуктов ПОЛ. Изменения иммунного статуса при ХПН включают депрессию Th1- и Th2-зависимого иммунного ответа, снижение количества лимфоцитов, несущих маркеры Т- и В-клеток, увеличение концентрации в крови IL-1b, снижение концентрации IFNγ и IL-4. Патогенез изменений иммунного статуса, в том числе, связан с увеличением количества лимфоцитов в периферической крови с ранними и поздними признаками апоптоза, некроза, увеличения концентрации в крови IL-1β, общего кальция, ПТГ, снижения концентрации IFNγ, увеличением количества первичных, вторичных и конечных продуктов ПОЛ в лимфоцитах периферической крови, угнетением активности СОД и каталазы в плазме. Применение амлодипина приводит к восстановлению Th1- и Th2- зависимого иммунного ответа, увеличению количества лимфоцитов, несущих маркеры Т- и В-клеток. Механизм иммунотропного действия амлодипина связан со снижением количества лимфоцитов в периферической крови с ранними и поздними признаками апоптоза, признаками некроза, ПОЛ-ограничивающим эффектом в лимфоцитах периферической крови, повышением активности СОД в плазме.

The purpose of this study was to assess some mechanisms of changes in immune state, and to evaluate a role of amlodipine, a known calcium channel blocker, as a potential corrective drug in experimental chronic renal failure (CRF). An animal CRF model was produced in rats by a two-stage operative resection of 5/6 of the renal tissue. Amlodipine is used per os at a daily dose of 0.25 mg/kg for 7 days. Flow cytofluorimetric approach was used to discern peripheral blood lymphocytes: CD3+ (mainly, T lymphocytes), CD45RA+ (mainly, B cells), as well as the following cell markers: Annexin 5-FITC+/7-AAD- (early apoptosis), Annexin 5-FITC+/7-AAD+ (late apoptosis and, in part, necrotic cells). Moreover, we have measured serum concentrations of urea, creatinine, phosphate, total calcium, parathyroid hormone (PTH), IL-1β, IL-4, interferon-γ, superoxide dismutase (SOD) and catalase activities. Evaluation of Th1- and Th2-dependent immune response was carried out, respectively, by detection of delayed-type hypersensitivity, and scoring the antibody-forming cells in rat spleen induced by immunization with allogeneic erythrocytes. Primary, secondary and final products of lipid peroxidation were evaluated in lipid extracts from peripheral blood lymphocytes. Changes of immune state in CRF included depression of Th1 and Th2 dependent immune response, reduced number of lymphocytes bearing T and В cell markers, increased IL-1β concentrations in blood, along with decreased amounts of IFNγ and IL-4. Probable pathogenesis of the altered immune state may be associated with increased number of peripheral lymphocytes being at early and late stages of apoptosis/necrosis, elevated blood levels of IL-1β, total calcium, parathyroid hormone, reduced concentrations of IFNγ, and increased contents of primary, secondary and final peroxidation products in peripheral blood lymphocytes, being accompanied by inhibition of the SOD and catalase activity in blood plasma. Amlodipine administration lead to restoration of Th1 and Th2 dependent immune response, increased number of cells positive for T and B lymphocyte markers. Probable immune mechanisms of amlodipine effects may be associated with decreased numbers of apoptotic/necrotic lymphocytes, reduced lipid peroxidation in peripheral blood lymphocytes, enhanced SOD activity in blood plasma.

амлодипиниммунный статусцитокиныапоптоз лимфоцитовсвободно-радикальное окислениехроническая почечная недостаточностьamlodipineimmune statecytokineslymphocytesapoptosisfree radical oxidationchronic renal failureReferencesБикбов Б.Т. , Томилина Н.А. Заместительная почечная терапия больных с ХПН в РФ в 1998-2011 гг. // Нефрология и диализ, 2014. № 1. С. 11-127. [Bikbov B.T., Tomilina Н.А. The replaceable kidney therapy of patients with chronic renal failure in the Russian Federation in 1998-2011. Nefrologiya i dializ = Nephrology and Dialysis, 2014, no. 1, pp 11-127. (In Russ.)]Бикбов Б.Т. , Томилина Н.А. Заместительная почечная терапия больных с ХПН в РФ в 1998-2011 гг. // Нефрология и диализ, 2014. № 1. С. 11-127. [Bikbov B.T., Tomilina Н.А. The replaceable kidney therapy of patients with chronic renal failure in the Russian Federation in 1998-2011. Nefrologiya i dializ = Nephrology and Dialysis, 2014, no. 1, pp 11-127. (In Russ.)]Волчегорский И.А., Налимов А.Г., Яровинский Б.Г. Сопоставление различных подходов к определению продуктов ПОЛ в гептан-изопропанольных экстрактах крови // Вопросы медицинской химии, 1989. Т. 35, № 1. С. 127-131. [Volchegorsky I.A., Burbots A.G., Yarovinsky B.G. Comparison of various approaches to definition of products the oxidation of lipids in the geptan-izopropanol blood extracts. Voprosy meditsinskoy khimii = Problems of Medical Chemistry, 1989, Vol. 35, no. 1, pp. 127-131. (In Russ.)]Волчегорский И.А., Налимов А.Г., Яровинский Б.Г. Сопоставление различных подходов к определению продуктов ПОЛ в гептан-изопропанольных экстрактах крови // Вопросы медицинской химии, 1989. Т. 35, № 1. С. 127-131. [Volchegorsky I.A., Burbots A.G., Yarovinsky B.G. Comparison of various approaches to definition of products the oxidation of lipids in the geptan-izopropanol blood extracts. Voprosy meditsinskoy khimii = Problems of Medical Chemistry, 1989, Vol. 35, no. 1, pp. 127-131. (In Russ.)]Коралюк М.А., Майорова И.Г. Определение активности каталазы // Лабораторное дело, 1988. № 1. С. 16-19. [Koralyuk M.A., Mayorova I.G. Determination of activity of a catalase. Laboratornoe delo = Laboratory Diagnostics, 1988, no. 1, pp. 16-19. (In Russ.)]Коралюк М.А., Майорова И.Г. Определение активности каталазы // Лабораторное дело, 1988. № 1. С. 16-19. [Koralyuk M.A., Mayorova I.G. Determination of activity of a catalase. Laboratornoe delo = Laboratory Diagnostics, 1988, no. 1, pp. 16-19. (In Russ.)]Осиков М.В. Роль орозомукоида в регуляции активности систем плазменного протеолиза при экспериментальной почечной недостаточности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2009. Т. 148, № 7. С. 27-30. [Osikov M.V. Role of an orozomukoid in regulation of activity of systems of a plasma proteoliz at an experimental renal failure. Byulleten` eksperimental`noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2009, Vol. 148, no. 7, pp. 27-30. (In Russ.)]Осиков М.В. Роль орозомукоида в регуляции активности систем плазменного протеолиза при экспериментальной почечной недостаточности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2009. Т. 148, № 7. С. 27-30. [Osikov M.V. Role of an orozomukoid in regulation of activity of systems of a plasma proteoliz at an experimental renal failure. Byulleten` eksperimental`noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2009, Vol. 148, no. 7, pp. 27-30. (In Russ.)]Осиков М.В., Григорьев Т.А., Федосов А.А. Роль эритропоэтина в реализации тромбоцитарно-клеточных взаимодействий в крови при хронической почечной недостаточности // Фундаментальные исследования, 2012. № 10-2. С. 285-289. [Osikov M.V., Grigoriev T.A., Fedosov A.A. Role of an eritropoetin in realization of trombotsitarno-cellular interactions in blood at a chronic renal failure. Fundamental`nye issledovaniya = Basic Researches, 2012, no. 10-2, pp. 285-289. (In Russ.)]Осиков М.В., Григорьев Т.А., Федосов А.А. Роль эритропоэтина в реализации тромбоцитарно-клеточных взаимодействий в крови при хронической почечной недостаточности // Фундаментальные исследования, 2012. № 10-2. С. 285-289. [Osikov M.V., Grigoriev T.A., Fedosov A.A. Role of an eritropoetin in realization of trombotsitarno-cellular interactions in blood at a chronic renal failure. Fundamental`nye issledovaniya = Basic Researches, 2012, no. 10-2, pp. 285-289. (In Russ.)]Осиков М.В., Телешева Л.Ф., Агеев Ю.И. Патофизиологические аспекты изменения и коррекции врожденного иммунитета при хронической почечной недостаточности // Современные проблемы науки и образования, 2013. № 5. [Электронный ресурс] [Osikov M. V., Telesheva L.F., Ageev Yu.I. Pathophysiological aspects of change and correction of congenital immunity at a chronic renal failure. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya [Elektronnyy resurs] = Modern Problems of Science and Education [An electronic resource], 2013, no. 5. URL: www.science-education.ru/111-9998 (date of the address: 21.01.2016). (In Russ.)]Осиков М.В., Телешева Л.Ф., Агеев Ю.И. Патофизиологические аспекты изменения и коррекции врожденного иммунитета при хронической почечной недостаточности // Современные проблемы науки и образования, 2013. № 5. [Электронный ресурс] [Osikov M. V., Telesheva L.F., Ageev Yu.I. Pathophysiological aspects of change and correction of congenital immunity at a chronic renal failure. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya [Elektronnyy resurs] = Modern Problems of Science and Education [An electronic resource], 2013, no. 5. URL: www.science-education.ru/111-9998 (date of the address: 21.01.2016). (In Russ.)]Осиков М.В., Григорьев Т.А. Влияние эритропоэтина на активность систем плазменного протеолиза при экспериментальной почечной недостаточности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2012. Т. 153. № 1. С. 27-30. [Osikov M.V., Grigoriev T.A. Influence of an eritropoetin on activity of systems of a plasma proteoliz at an experimental renal failure. Byulleten` eksperimental`noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2012, Vol. 153, no. 1, pp. 27-30. (In Russ.)]Осиков М.В., Григорьев Т.А. Влияние эритропоэтина на активность систем плазменного протеолиза при экспериментальной почечной недостаточности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2012. Т. 153. № 1. С. 27-30. [Osikov M.V., Grigoriev T.A. Influence of an eritropoetin on activity of systems of a plasma proteoliz at an experimental renal failure. Byulleten` eksperimental`noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2012, Vol. 153, no. 1, pp. 27-30. (In Russ.)]Осиков М.В., Ахматов К.В., Федосов А.А. К вопросу о механизме влияния эритропоэтина на аффективный статус у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе // Фундаментальные исследования, 2012. № 7-1. С. 140-145. [Osikov M.V., Akhmatov K.V., Fedosov A.A. To a question of the mechanism of influence of an eritropoetin on the affective status at the patients with a chronic renal failure who are on a hemodialysis. Fundamental`nye issledovaniya = Basic Researches, 2012, no. 7-1, pp. 140-145. (In Russ.)]Осиков М.В., Ахматов К.В., Федосов А.А. К вопросу о механизме влияния эритропоэтина на аффективный статус у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе // Фундаментальные исследования, 2012. № 7-1. С. 140-145. [Osikov M.V., Akhmatov K.V., Fedosov A.A. To a question of the mechanism of influence of an eritropoetin on the affective status at the patients with a chronic renal failure who are on a hemodialysis. Fundamental`nye issledovaniya = Basic Researches, 2012, no. 7-1, pp. 140-145. (In Russ.)]Осиков М.В., Черепанов Д.А., Гизингер О.А. Роль гиперпаратиреоза в формировании иммунного статуса при хронической почечной недостаточности (экспериментальное исследование) // Вестник Южно-Уральского государственного университета. Серия: Образование, здравоохранение, физическая культура, 2015. Т. 15, № 2. С. 45-51. [Osikov M.V., Cherepanov D.A., Gizinger O.A. Role of a giperparatireoz in formation of the immune status at a chronic renal failure (pilot study). Vestnik Yuzhno-Ural`skogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya: Obrazovanie, zdravookhranenie, fizicheskaya kul`tura = Bulletin of the Southern Ural State University. Series: Education, Health care, Physical culture, 2015, Vol. 15, no. 2, pp. 45-51. (In Russ.)]Осиков М.В., Черепанов Д.А., Гизингер О.А. Роль гиперпаратиреоза в формировании иммунного статуса при хронической почечной недостаточности (экспериментальное исследование) // Вестник Южно-Уральского государственного университета. Серия: Образование, здравоохранение, физическая культура, 2015. Т. 15, № 2. С. 45-51. [Osikov M.V., Cherepanov D.A., Gizinger O.A. Role of a giperparatireoz in formation of the immune status at a chronic renal failure (pilot study). Vestnik Yuzhno-Ural`skogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya: Obrazovanie, zdravookhranenie, fizicheskaya kul`tura = Bulletin of the Southern Ural State University. Series: Education, Health care, Physical culture, 2015, Vol. 15, no. 2, pp. 45-51. (In Russ.)]Шуркалин Б.К., Горский В.А., Фаллер А.П. Руководство по экспериментальной хирургии. М., 2010. 176 с. [Shurkalin B.K., Gorskiy V.A., Faller A.P. Rukovodstvo on experimental surgery]. Moscow, 2010. 176 p.Шуркалин Б.К., Горский В.А., Фаллер А.П. Руководство по экспериментальной хирургии. М., 2010. 176 с. [Shurkalin B.K., Gorskiy V.A., Faller A.P. Rukovodstvo on experimental surgery]. Moscow, 2010. 176 p.Чевари С., Секей И. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах // Лабораторное дело, 1985. № 11. С. 678-681. [Chevari S., Sekey I. Role of superoxide dismutases in oxidizing processes of a cage and a method of its definition in biological materials. Laboratornoe delo = Laboratory Diagnostics, 1985, no. 11, pp. 678-681. (In Russ.)]Чевари С., Секей И. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах // Лабораторное дело, 1985. № 11. С. 678-681. [Chevari S., Sekey I. Role of superoxide dismutases in oxidizing processes of a cage and a method of its definition in biological materials. Laboratornoe delo = Laboratory Diagnostics, 1985, no. 11, pp. 678-681. (In Russ.)]Betjes M.G. Immune cell dysfunction and inflammation in end-stage renal disease. Nat. Rev. Nephrol., 2013, Vol. 5, pp. 255-265.Betjes M.G. Immune cell dysfunction and inflammation in end-stage renal disease. Nat. Rev. Nephrol., 2013, Vol. 5, pp. 255-265.Nusair M.B., Rajpurohit J. Chronic inflammation and coronary atherosclerosis in patients with end-stage renal. Cardiorenal. Med., 2012, Vol. 2, no. 2, pp. 117-124.Nusair M.B., Rajpurohit J. Chronic inflammation and coronary atherosclerosis in patients with end-stage renal. Cardiorenal. Med., 2012, Vol. 2, no. 2, pp. 117-124.Eleftheriadis T., Pissas G., Alles D. Increased plasma angiogenin level is associated and may contribute to decreased T-cell zeta-chain expression in hemodialysis patients. Ther. Apher. Dial., 2013, Vol. 17, no. 1, pp. 48-54.Eleftheriadis T., Pissas G., Alles D. Increased plasma angiogenin level is associated and may contribute to decreased T-cell zeta-chain expression in hemodialysis patients. Ther. Apher. Dial., 2013, Vol. 17, no. 1, pp. 48-54.Kamanna V.S., Sanders R., Ganji S.H., Kamanna V.S., Kashyap M.L. Iron sucrose promotes endothelial injury and dysfunction and monocyte adhesion. Am. J. Nephrol., 2012, Vol. 35, no. 2, pp. 114-119.Kamanna V.S., Sanders R., Ganji S.H., Kamanna V.S., Kashyap M.L. Iron sucrose promotes endothelial injury and dysfunction and monocyte adhesion. Am. J. Nephrol., 2012, Vol. 35, no. 2, pp. 114-119.Meijers R.W., Meijers R.W., Litjens N.H., de Wit E.A., Langerak A.W., Van der Spek A., Baan C.C., Weimar W., Betjes M.G. Uremia causes premature ageing of the T cell compartment in end-stage renal disease patients. Immun. Ageing., 2012, Vol. 9, no. 1, p. 19.Meijers R.W., Meijers R.W., Litjens N.H., de Wit E.A., Langerak A.W., Van der Spek A., Baan C.C., Weimar W., Betjes M.G. Uremia causes premature ageing of the T cell compartment in end-stage renal disease patients. Immun. Ageing., 2012, Vol. 9, no. 1, p. 19.Wahl P. FGF23 in chronic kidney disease. Adv. Exp. Med. Biol., 2012, Vol. 728, pp. 107-125.Wahl P. FGF23 in chronic kidney disease. Adv. Exp. Med. Biol., 2012, Vol. 728, pp. 107-125.Massry S., Smogorzewski М. Dysfunction of polymorphonuclear leukocytes in uremia: role of parathyroid hormone. Kidney Int. Suppl., 2001, Vol. 78, pp. S195-196.Massry S., Smogorzewski М. Dysfunction of polymorphonuclear leukocytes in uremia: role of parathyroid hormone. Kidney Int. Suppl., 2001, Vol. 78, pp. S195-196.Chandra A., Lin T., Zhu J. PTH1-34 blocks radiation-induced osteoblast apoptosis by enhancing DNA repair through canonical Wnt pathway. J. Biol. Chem., 2015, Vol. 290, no. 1, pp. 157-167.Chandra A., Lin T., Zhu J. PTH1-34 blocks radiation-induced osteoblast apoptosis by enhancing DNA repair through canonical Wnt pathway. J. Biol. Chem., 2015, Vol. 290, no. 1, pp. 157-167.Deicher R., Kirsch B., Mullner M. Impact of parathyroidectomy on neutrophil cytosolic calcium in chronic kidney disease patients: A prospective parallel group trial. J. Intern. Med., 2005, Vol. 258, pp. 67-76.Deicher R., Kirsch B., Mullner M. Impact of parathyroidectomy on neutrophil cytosolic calcium in chronic kidney disease patients: A prospective parallel group trial. J. Intern. Med., 2005, Vol. 258, pp. 67-76.Dong J., Wang Q., Chen M.H. Associations between serum-intact parathyroid hormone, serum 25-hydroxyvitamin D, oral vitamin D analogs and metabolic syndrome in peritoneal dialysis patients: a multicenter cross-sectional study. Perit. Dial. Int., 2014, Vol. 34, no. 4, pp. 447-455.Dong J., Wang Q., Chen M.H. Associations between serum-intact parathyroid hormone, serum 25-hydroxyvitamin D, oral vitamin D analogs and metabolic syndrome in peritoneal dialysis patients: a multicenter cross-sectional study. Perit. Dial. Int., 2014, Vol. 34, no. 4, pp. 447-455.Mitnick M.A. Parathyroid hormone induces hepatic production of bioactive interleukin-6 and its soluble receptor. American J. Physiol.: Endocrinology and Metabolism, 2001, Vol. 280, no. 3, pp. 405-412.Mitnick M.A. Parathyroid hormone induces hepatic production of bioactive interleukin-6 and its soluble receptor. American J. Physiol.: Endocrinology and Metabolism, 2001, Vol. 280, no. 3, pp. 405-412.Massry S., Smogorzewski M. Dysfunction of polymorphonuclear leukocytes in uremia: role of parathyroid hormone. Kidney Int. Suppl., 2001, Vol. 78, pp. 195-196.Massry S., Smogorzewski M. Dysfunction of polymorphonuclear leukocytes in uremia: role of parathyroid hormone. Kidney Int. Suppl., 2001, Vol. 78, pp. 195-196.Packard R.R., Libby P. Inflammation in atherosclerosis: from vascular biology to biomarker discovery and risk prediction. Clin. Chem., 2008, Vol. 54, pp. 24-38.Packard R.R., Libby P. Inflammation in atherosclerosis: from vascular biology to biomarker discovery and risk prediction. Clin. Chem., 2008, Vol. 54, pp. 24-38.Pinheiro P.L., Cardoso J.C., Power D.M. Functional characterization and evolution of PTH/PTHrP receptors: insights from the chicken. BMC Evol. Biol., 2012, Vol. 12, p. 110.Pinheiro P.L., Cardoso J.C., Power D.M. Functional characterization and evolution of PTH/PTHrP receptors: insights from the chicken. BMC Evol. Biol., 2012, Vol. 12, p. 110.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.